Kadar hemoglobin darah dapat ditentukan dengan
bermacam-macam cara . yang banyak dipakai dalam laboratorium klinik ialah
cara-cara fotoelektrik dan kolorimetrik visual.
Cara fotoelektrik:
sianmethemoglobin
Hemoglobin
darah diubah menjadi sianmethemoglobin (hemoglobinsianida) dalam larutan yang
berisi kaliumferrisianida dan kaliumsianida. Absorbansi larutan diukur pada
gelobang 540 nm atau filter hijau. Larutan Drabkin yang dipakai pada cara ini
mengubah hemoglobin, oksihemoglobin, methemoglobin dan karboksihemoglobin
menjadi sianmethemoglobin. Sulfhemoglobin tidak berubah dan karena itu tidak
ikut diukur.
Cara
1. Ke
dalam tabung kolorimeter dimasukkan 5,0 ml larutan Drabkin.
2. Dengan
pipet hemoglobin diambil 20 µl arah (kapiler, EDTA atau oxalat); sebelah luar
ujung pipet dibersihkan, lalu darah itu dimasukkan ke dalam tabung kolorimeter
dengan membilasnya beberapa kali.
3. Campurlah
isi tabung dengan membalikkannya beberapa kali. Tindakan ini juga akan
menyelenggarakan perubahan hemoglobin menjadi sianmethemoglobin.
4. Bacalah
dalam spektrofotometer pada gelombang 540 nm; sebagai blanko digunakan larutan
Drabkin.
5. Kadar
hemoglobin ditentukan dari perbandingan absorbansinya dengan absorbansi
standard sianmethemoglobin atau dibaca dari kurve tera.
Referensi:
Gandosoebrata, R.
Penuntun Laboratorium Klinik, Dian Rakyat. Jakarta, 1984
Tidak ada komentar:
Posting Komentar